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OBSERVACIÓN DE CÉLULAS DE LA EPIDERMIS DE LA CEBOLLA
MATERIAL - Pinzas, aguja enmangada - Cuentagotas - Frasco lavador con agua - Hoja de afeitar o bisturí (escalpelo) - Microscopio, portas y cubres - Papel de filtro - Hoja carnosa de cebolla - Glicerina al 50 % - Rojo neutro 1/5000 - Ácido acético - Cubeta de tinción a) OBSERVACIÓN DE LAS CÉLULAS DE LA CEBOLLA SIN COLORANTE PROTOCOLO 1. Extraer una de las hojas internas de un bulbo de cebolla. Tomar con unas pinzas un trozo de 1 cm² de la membrana que está adherida en la cara interna cóncava. Para ello, con el escalpelo trazar dos cortes paralelos a 1 cm de distancia; pasar el escalpelo por debajo, levantando la epidermis.
PROTOCOLO 3. Poner unas gotas de rojo neutro en un borde el cubre, y en el opuesto un trocito de papel de filtro. Se apreciará la penetración del colorante en la célula, coloreándose sólo la vacuola (que toma un tinte rosa pálido). c) FIJACIÓN DE LAS CÉLULAS DE LA CEBOLLA PROTOCOLO 4. Para la fijación y tinción, levantar el porta y añadir dos gotas de ácido acético, dejándolo 2 minutos. Después secar con papel de filtro. La célula muere y queda fijada por el ácido acético, desplazándose el colorante de la vacuola al núcleo y granulaciones. 5. Colocar una gota de glicerina al 50 %, el cubre y observar. VARIANTES (ver fig.) El apto. 3 de (b) también puede intentarse con azul de metileno (o verde de metilo), dejando reposar durante 3 minutos (ó 5 minutos, respectivamente). Entonces hay lavar la preparación de forma que el agua resbale y arrastre el sobrante de colorante. Después secamos el porta, por la cara inferior, a la llama del mechero Bunsen. Una vez seca la preparación, se añade una gota de glicerina al 50 %, se pone un cubre, y se lleva al microscopio para su observación. Nota: Preparación del verde de metilo acético: 1 g de colorante verde de metilo en polvo + 100 ml de alcohol etílico + 1 ml de ácido acético glacial. |
